水中總氮項(xiàng)目的測定常采用堿性過硫酸鉀消解紫外分光光度法。采用這種方法的優(yōu)點(diǎn)是步驟相對簡單，所需試劑較少，要求使用的儀器設(shè)備一般實(shí)驗(yàn)室都能具備。要做好總氮的空白實(shí)驗(yàn)，不僅與試劑有關(guān)，而且還與實(shí)驗(yàn)用水、器皿、家用壓力鍋或醫(yī)用手提蒸氣滅菌器的壓力、實(shí)驗(yàn)室環(huán)境及方法步驟的掌握等因素關(guān)系密切。

　　1、試劑的配制、存放

　　堿性過硫酸鉀的配制過程十分重要，掌握不好，會(huì)影響消解效果，對測定結(jié)果產(chǎn)生一定的影響。GB11894—89中關(guān)于堿性過硫酸鉀的配制，只是簡單的說將過硫酸鉀和*溶于水中，并未作其它要求。實(shí)際上，過硫酸鉀的溶解速度非常慢，若要加快溶解，絕對不能盲目加熱，即使加熱，也最好采用水浴加熱法，且水浴溫度一定要低于60℃，否則過硫酸鉀會(huì)分解失效。配制該溶液時(shí)，可分別稱取過硫酸鉀和*，兩者分開配制，再混合定容，或者先配制*溶液，待其溫度降到室溫后再加入過硫酸鉀溶解。若二者在一只燒杯中溶于水，應(yīng)緩慢加水，同時(shí)攪拌，防止*放熱使溶液溫度過高引起局部過硫酸鉀失效。

　　過硫酸鉀的存放也要注意，應(yīng)避免與還原性物質(zhì)、硫、磷等混合存放，另外，過硫酸鉀易吸潮，放出氧氣，因此，為防止失效，要將其放在干燥的試劑櫥中。

　　2、無氨水的制備

　　實(shí)驗(yàn)過程對水的要求非常嚴(yán)格，普通的蒸餾水往往還達(dá)不到實(shí)驗(yàn)要求。這時(shí)需再做二次加工以得到無氨水。在用蒸餾法制備無氨水時(shí)，GB11894—89中指出：“棄去前50ml餾出液，然后將餾出液收集在帶有玻璃塞的玻璃瓶中”。

　　3、實(shí)驗(yàn)室環(huán)境

　　總氮的分析應(yīng)在無氨的實(shí)驗(yàn)室環(huán)境中進(jìn)行，室內(nèi)不應(yīng)含有揚(yáng)塵、石油類及其它的氮化合物，絕對不能在分析氨氮等氮類項(xiàng)目的實(shí)驗(yàn)室中做總氮項(xiàng)目的分析，所使用的試劑、玻璃器皿等也要單獨(dú)存放，避免交*污染，影響空白值。

　　4、玻璃器皿的洗滌

　　所使用的玻璃器皿應(yīng)先用(1+9)鹽酸浸泡后，再用無氨水沖洗數(shù)次才能使用，否則，也會(huì)造成空白值偏高或平行性較差的情況。

　　5、消解溫度、壓力的控制

　　對于使用醫(yī)用手提蒸氣滅菌器的實(shí)驗(yàn)室，因測定壓力為1.1~1.4kg/cm2，溫度為120℃~124℃，此時(shí)可以安裝一個(gè)穩(wěn)壓器，將壓力控制在該范圍，這樣就省去了通過人為切斷電源控制的麻煩，穩(wěn)定且省力。

　　6、比色時(shí)的注意事項(xiàng)

　　該項(xiàng)目的測定涉及兩個(gè)波長(220nm和275nm)，有條件的實(shí)驗(yàn)室可采用雙光路紫外分光光度計(jì)，其優(yōu)點(diǎn)是方便快速、可以避免反復(fù)調(diào)整波長產(chǎn)生測量誤差，皿間誤差也能自動(dòng)修正。如果沒有雙光路的光度計(jì)，建議在測定完一組樣品的同一波長后，再調(diào)整到另一波長，統(tǒng)一測定，不要測完一個(gè)樣品的兩個(gè)吸光度后再換另一個(gè)樣品，這樣反復(fù)調(diào)整波長會(huì)引起一定的測量誤差。

　　7、試劑的選擇

　　堿性過硫酸鉀消解紫外分光光度法測定總氮的過程中，過硫酸鉀是至關(guān)重要的試劑。首先，試劑的純度關(guān)系到空白值的高低、測定結(jié)果的準(zhǔn)確度。一般普通分析純過硫酸鉀的總氮含量最高不超過0.005%，但由于試劑質(zhì)量存在差異，有些廠家、批次的試劑含氮量常常達(dá)不到這個(gè)要求，致使空白值偏高。另外，分析純*的氮化合物含量雖然大大低于過硫酸鉀的含氮量，但也要仔細(xì)選擇。筆者在工作中就曾遇到過將過硫酸鉀溶液與*溶液混合成堿性過硫酸鉀溶液時(shí)，竟散發(fā)出氨水氣味的現(xiàn)象，這說明試劑的純度不夠。因此，有條件的話建議使用優(yōu)級純或基準(zhǔn)試劑，盡量降低試劑中的含氮量，從而降低實(shí)驗(yàn)空白值。

　　8、實(shí)驗(yàn)用水及試劑的質(zhì)量檢驗(yàn)

　　若實(shí)驗(yàn)的空白值不夠理想，則需要對實(shí)驗(yàn)用水及試劑進(jìn)行檢驗(yàn)，以選擇出含氮量至低的水和試劑，獲得理想的空白值。筆者的經(jīng)驗(yàn)是，若每換一種水、每換一個(gè)廠家、一個(gè)批次的過硫酸鉀、*試劑就全過程做一遍總氮，將是相當(dāng)麻煩的，而且最終還往往難以得出結(jié)論。以下總結(jié)出的一點(diǎn)簡便的方法，僅供參考。

　　8.1 水的檢驗(yàn)：將所有待選的實(shí)驗(yàn)用水分別裝入石英比色皿中，分別在220nm和275nm波長處測其吸光度，按A220nm-2A275nm對對吸光度進(jìn)行修正，以修正后吸光度值最小的水為實(shí)驗(yàn)用水。
8.2 試劑的檢驗(yàn)：將所有待檢的過硫酸鉀、*按其在實(shí)驗(yàn)時(shí)消解定容后的溶液中的含量分別配成相應(yīng)濃度的溶液，以此溶液作為樣品，分別測定其氨氮、硝酸鹽氮的吸光度，擇其吸光度至低者而用即可，若有必要，也可進(jìn)一步計(jì)算其氮含量。